對抗原的要求是純度越高越好，尤其是初次免疫所用的抗原。
如為細胞抗原，可取1×107個細胞作腹腔免疫。可溶性抗原需加完全福氏佐劑并經充分乳化，如為聚丙烯酰胺電泳純化的抗原，可將抗原所在的電泳條帶切下，研磨后直接用以動物免疫。
還有一些半抗原，如多肽，在免疫之前是需要耦聯一些蛋白，如KLH，BSA等。
病毒類的抗原，可以直接用于免疫。
如果是蛋白，一般來說，蛋白的純度要在90％以上，濃度在1mg/ml以上，分子量>10kd。一般最好溶解在無毒的緩沖液中 ，建議溶解在PBS中。